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細胞的染色法
更新時間:2016-09-06   點擊次數(shù):660次

細胞的染色法
細胞經(jīng)甲基綠一呱咯寧混合液處理后,其中的 DNA 和 RNA 出現(xiàn)不同的呈色反應(yīng),一般認為這是由于帶有負電荷的核酸對堿性染料呱咯寧和甲基綠具有親和力,且這兩種染料的作用有選擇性,甲基綠染高聚分子的 DNA 呈藍綠色,呱咯寧染低聚分子的 RNA 呈紅色。由此對細胞中的 DNA 和 RNA 進行定位、定性、和定量分析。
由于不同的蛋白質(zhì)分子所帶的堿性和酸性基團的數(shù)目不同,在 pH 值不同的溶液中,蛋白質(zhì)分子所帶的凈電荷多少不同。如在生理條件下,整個蛋白質(zhì)所帶負電荷多,則為酸性蛋白質(zhì);帶正電荷多,則為堿性蛋白質(zhì)。據(jù)此,可將標本經(jīng)三氯醋酸處理提出核酸后,用不同 pH 值的固綠染液分別染色,細胞內(nèi)的酸性蛋白和堿性蛋白質(zhì)顯示出來。
過氧化物酶能把許多胺類氧化為有色化合物,用聯(lián)苯胺處理標本,細胞內(nèi)的過氧化物酶能把聯(lián)苯胺氧化為藍色的聯(lián)苯胺藍,進而變?yōu)樽厣a(chǎn)物,因而可以根據(jù)顏色反應(yīng)來判定過氧化物酶的有無或多少。
組織、細胞的多糖、粘多糖及粘蛋白等都可用 PAS 法來顯示,其化學(xué)基礎(chǔ)是利用過碘酸的氧化作用,打開碳鏈形成醛,生成的醛基與 Schiff 試劑中的無色品紅反應(yīng)形成紫紅色化合物。

 

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