細(xì)胞系的維持是培養(yǎng)工作重要內(nèi)容。通過換液、傳代、再換液、再傳代和細(xì)胞凍存實(shí)現(xiàn)細(xì)胞系的維持,但對(duì)每一個(gè)細(xì)胞系來說都有其自身特點(diǎn)。
①細(xì)胞系檔案要記錄好,如組織來源,生物學(xué)特性,培養(yǎng)液要求、傳代、換液時(shí)間和規(guī)律,細(xì)胞的遺傳學(xué)標(biāo)志,生長形態(tài),常規(guī)病理染色的標(biāo)本等。這些記錄對(duì)于保證細(xì)胞正常生長,保持細(xì)胞的一致、觀察長期體外培養(yǎng)后細(xì)胞特性的改變都有十分重要的意義。因此,無論在索取新細(xì)胞系還是自己建立新細(xì)胞系時(shí)都要盡可能把上述資料收集齊全。
②細(xì)胞系的傳代、換液一般都有自身的規(guī)律性,因此在維持傳代時(shí)要注意保持其穩(wěn)定的規(guī)律性,這樣可以減少由于傳代時(shí)細(xì)胞密度的頻繁增減或換液時(shí)間的不規(guī)律而導(dǎo)致細(xì)胞生長特性發(fā)生改變,影響以后細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。
③多種細(xì)胞系維持傳代,要嚴(yán)格操作程序,以防細(xì)胞之間的交叉污染。傳代時(shí)所用器械要編號(hào)或做好標(biāo)記,嚴(yán)禁交叉使用。
④每一種細(xì)胞系都應(yīng)有充足的凍存儲(chǔ)備,防止由于培養(yǎng)細(xì)胞污染等因素造成細(xì)胞系的絕種;另外,二倍體細(xì)胞等有限細(xì)胞系如果暫時(shí)不用,凍存,以免傳代太多,造成細(xì)胞衰老或發(fā)生改變。