我先用石蠟切片做了5次,結(jié)果一直不理想(表現(xiàn)為未見特異性強(qiáng)染色);近幾日,我又切了冰凍切片,做了2次,終于基本成功了。在這個(gè)過程中,我對(duì)免疫熒光染色技術(shù)有了全新的認(rèn)識(shí),而前些天發(fā)出免疫熒光求助貼,回復(fù)的很少,所以有必要加強(qiáng)對(duì)免疫熒光方面的討論),不妥之處敬請(qǐng)指正。有人會(huì)問酶免疫組化做的好好的,為何要做免疫熒光?其實(shí),這也是我以前思考的難題,現(xiàn)在我認(rèn)為可能胞膜蛋白含量不高,用普通免疫免疫組化可能做不出來,需要敏感的免疫熒光方法來進(jìn)行蛋白檢測(我是看許多外文文獻(xiàn)都是這樣做的,因此選擇免疫熒光染色。)抗體
陰性染色產(chǎn)生的原因有:
(1)一抗和二抗?jié)舛炔缓线m或孵育條件不妥。
(2)熒光素提前衰退。熒光素質(zhì)量不佳或操作過程中沒有注意避光等防止熒光素衰退的事項(xiàng)。
(3)血清封閉時(shí)間過長。
(4)抗體稀釋液PH值不合適,影響抗原抗體反應(yīng)。
(5)組織切片不平、裂片或脫片很嚴(yán)重,易引起大塊陰性著色。
(6)組織標(biāo)本不新鮮或已經(jīng)冷凍組織制成的切片中抗原易彌散,易引起本來表達(dá)的部位陰性染色或弱著色。
(7)熒光顯微鏡不會(huì)使用,激發(fā)波長選擇錯(cuò)誤。
Mouse Lysozyme,LZM ELISA Kit 小鼠溶菌酶 規(guī)格: 48T/96T
Mouse lymphocyte factor ELISA Kit 小鼠淋巴細(xì)胞因子 規(guī)格: 48T/96T
Mouse Lactate Dehydrogenase,LDH ELISA Kit 小鼠乳酸脫氫酶 規(guī)格: 48T/96T
Mouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit 小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子/雙調(diào)蛋白 規(guī)格: 48T/96T
Mouse Insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6 ELISA kit 小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6 規(guī)格: 48T/96T
mouse IgM ELISA kit 小鼠免疫球蛋白IgM 規(guī)格: 48T/96T
mouse IgG ELISA kit 小鼠免疫球蛋白IgG 規(guī)格: 48T/96T
mouse IgA ELISA kit 小鼠免疫球蛋白IgA 規(guī)格: 48T/96T
Mouse eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit 小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白 規(guī)格: 48T/96T
Mouse D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH ELISA Kit 小鼠D-乳酸脫氫酶 規(guī)格: 48T/96T
抗體Mouse Cross-linked Carboxy-terminal opeptide of type I collagen, I CTP ELISA Kit 小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽 規(guī)格: 48T/96T
Mouse Cluster of differentiation 3,CD3 ELISA Kit 小鼠CD3分子 規(guī)格: 48T/96T
Mouse Cluster of differentiation 19,CD19 ELISA Kit 小鼠CD19分子 規(guī)格: 48T/96T
Mouse c-jun ELISA Kit 小鼠c-jun 規(guī)格: 48T/96T