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炮姜LAMP鑒定試劑盒?準(zhǔn)備步驟
更新時(shí)間:2022-08-30   點(diǎn)擊次數(shù):691次

炮姜LAMP鑒定試劑盒準(zhǔn)備步驟:


1. DNA模板


2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)


3.10×PCR Buffer


4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM


5.Taq酶操作步驟 


1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。


      10×PCR buffer             5μl


      dNTP mixl                 4μl


       引物1(10pM)               2μl


       引物2(10PM)              2μl


       Taq酶(2U/μl)            1μl


      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl


      加ddH2O至               50 μl


    視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。


2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。


3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。


4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

血管緊張素原抗體

雄激素受體抗體

細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)蛋白抗體(凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑)

軸蛋白1抗體

自噬相關(guān)蛋白9B抗體

自噬相關(guān)蛋白12抗體

自噬相關(guān)蛋白13抗體

自噬相關(guān)蛋白3抗體

磷酸化活化復(fù)制因子2抗體

磷酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體

去整合素樣金屬蛋白酶18抗體

活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體

銜接蛋白β抗體

銜接蛋白γ/γ-Adaptin抗體

水通道蛋白-9抗體

膜粘連蛋白A3抗體

膜粘連蛋白 A4抗體

自噬相關(guān)蛋白8A抗體


 

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